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基于海洋光學(xué)HR2進(jìn)行牛血清白蛋白的吸光度測(cè)量

更新時(shí)間:2022-12-19      點(diǎn)擊次數(shù):1016

吸光度是用來衡量光被物質(zhì)吸收程度的一個(gè)物理量。利用光譜技術(shù)測(cè)量吸光度簡(jiǎn)便高效,因此被廣泛應(yīng)用于液體和氣體的吸光度測(cè)量,用于科研分析,還可集成至工業(yè)測(cè)試系統(tǒng)中。


為了評(píng)估新產(chǎn)品Ocean HR2吸光度測(cè)量性能,我們?cè)谡麴s水中測(cè)量了近30種不同濃度的503mg牛血清白蛋白(BSA通常用作生化應(yīng)用中的蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)品)樣品。


實(shí)驗(yàn)配置


本次實(shí)驗(yàn)的配置包括海洋光學(xué)Ocean HR2高分辨率光譜儀(190-880 nm)、一個(gè)帶衰減器的氘鎢鹵素光源、一對(duì)400μm光纖和一個(gè)帶比色皿支架的石英比色皿以及OceanView操作軟件、 OceanDirect二次開發(fā)包。

數(shù)據(jù)及分析


為了確保更好的測(cè)量結(jié)果,我們首先將光譜儀和光源預(yù)熱30分鐘,使光源處于熱平衡狀態(tài)。此外,為了防止出現(xiàn)誤差,我們無需將比色皿從比色皿支架上取下,而是在比色皿中直接進(jìn)行稀釋,使用一次性移液管加入部分樣品,然后再加入去離子水混合,并針對(duì)每個(gè)樣品重復(fù)該操作過程。

圖1.牛血清白蛋白樣品在280nm處吸收峰。


我們的測(cè)量集中在280nm處的BSA吸光度峰(圖1),其吸光度線性為0.999,極限值高達(dá)2.5 AU(圖2)。這種性能水平將有利于量化大多數(shù)類型的蛋白質(zhì)濃度,所以非常適用于生物方面的應(yīng)用,包括藥物配方的質(zhì)量監(jiān)測(cè)。

圖2.在近30個(gè)BSA樣品上測(cè)得的吸光度線性度高達(dá)0.999。


高速平均模式提高信噪比


高速平均模式(HSAM)是通過OceanDirect二次開發(fā)包實(shí)現(xiàn)的一種基于硬件加強(qiáng)信號(hào)的功能,可提高海洋光學(xué)光譜儀的信噪比性能。信噪比越高,光譜質(zhì)量越好,結(jié)果越準(zhǔn)確。


高速平均模式可以在給定時(shí)間段內(nèi)進(jìn)行更多次的平均,從而提供更高的信噪比,OceanDirect設(shè)備驅(qū)動(dòng)程序可以在200毫秒內(nèi)處理10,000個(gè)平均值,速度提高了10倍。這對(duì)于時(shí)間要求高的應(yīng)用和實(shí)時(shí)應(yīng)用非常重要,在這些應(yīng)用中,必須非??焖?、準(zhǔn)確地做出判斷。


總結(jié)

高分辨率(<1.0 nm FWHM)

高速采集(1 μs 積分時(shí)間)

高信噪比(380: 1)


Ocean HR2 集“三高"于一身的特性,使其成為蛋白質(zhì)樣品濃度測(cè)量、分子診斷、制藥材料污染物鑒定等多種應(yīng)用的理想選擇。


Ocean HR2 在實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)線上的表現(xiàn)都相當(dāng)出色,為客戶提供科研級(jí)光譜儀的性能。既能作為獨(dú)立設(shè)備使用,也可以作為集成設(shè)備中的關(guān)鍵子系統(tǒng)或組件。